
2024年9月由东莞农业科技综合大学张万刚传授销售团队在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章,研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低(P < 0.05),并表现出剂量依赖性的抑制作用,其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化,进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱动物为该研究提供了亚硝基化掩盖组学拜谱生物,助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。
中文翻译题目:体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响
刊物:Journal of Agricultural and Food Chemistry
2028年影响力指数公式:5.7
发表论文时:2024年9月
合作方企业单位:南京农业大学
探讨文件:蛋白
拜谱供给技術:亚硝基化修饰组学
技术设备的路线:
一、探讨结论
01.Caspase-3特异性
当今尚不弄清楚NO对caspase-3的仰制成用是否是归因于NO介导的S-亚硝基化,有差异 质量浓度梯度方向的GSNO成为外源性NO生产,以诱惑caspase-3的体内S-亚硝基化。后果显示,与不能GSNO的组优于,100、200和400μM GSNO组的caspase-3亲水性偏态有效降低了(图1),与仍然曝光不一。GSNO治理有效降低了caspase-3亲水性的不确定其原因仍尚待体现了。
图1 各种不同溶度的GSNO外理对caspase-3吸附性的印象
02.Caspase-3的S-亚硝基化成度
探析Caspase-3的亚硝基化层度,以阐释GSNO对Caspase-3的化学反应性。经GSNO除理后,检验到caspase-3核蛋白S-亚硝基化效果添加(图2)。等等結果呈现,外源性GSNO培养教育可胜利诱骗caspase-3的休外S-亚硝基化。从未有过惊愕的是,在没了GSNO现实存在的参考组中检验到某个微亮的S-亚硝基化带,这呈现caspase-3可能性的发生内源性的S-亚硝基化。再者,本探析中caspase-3的S-亚硝基化层度较高,而caspase-3的化学活化调低,这与以往的探析相一致。显然,caspase-3的特异形S-亚硝基化体现位点尚不知道,还需求进1步的不断探索。
图2 GSNO治理 对caspase-3S-亚硝基化品质的影响到
03.Caspase-3的S-亚硝基化位点
通过亚硝基化修饰语组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明,caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰(图3)。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中,分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶,其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化,说明Caspase-3易受亚硝基化修饰(图4)。此外,据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163,这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断,半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的,这可能影响蛋白降解,促进死后衰老。
图 3 caspase-3的字段。天蓝色标签的字段说明S-亚硝基化肽,灰色标签的C说明S-亚硝基化半胱氨酸
图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱图
04.S-亚硝基化Caspase-3吸附结蛋白酶
结球血清质酶酶质成为一款重点的人体血细胞骨架球血清质酶酶质,在恢复肌人体血细胞空间节构的空间节构完美性和收縮性等方面起关键点做用,实验S-亚硝基化caspase-3对结球血清质酶酶质吸附的铭感性和理性体现了重点作用。与Std(未用胱天球血清质酶酶质酶-3和GSNO孵育的初始值肌植物仟维球血清质酶酶质)组相对于,0 μM GSNO组(肌原植物仟维和caspase-3的孵育,无GSNO)的完美结球血清质酶酶质含碳量更为看不出大幅度降低,的提示caspase-3对结球血清质酶酶质体现了隐性的球血清质酶酶质油脂水解横向。在GSNO孵育后,完美结球血清质酶酶质的含碳量看不出延长(P < 0.05)。不仅如此,当GSNO酸度偏高时,完美结球血清质酶酶质的含碳量维持上涨(P < 0.05)(图5)。相应显示意味着,SNO体现的caspase-3以横向依赖于的行为抑制作用结球血清质酶酶质的吸附。
图5.S-亚硝基化caspase-3化学降解结蛋白酶
05.S-亚硝基化Caspase- 3挥发肌钙血清-T
肌钙淀粉酶酶-T (TnT)是原肌球淀粉酶酶调接复杂脂肪抽缩的细细的的必需品肌原人造玻纤淀粉酶酶。TnT的吸附塑料特征英文是检查测量到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化必备条件下,caspase-3对TnT的吸附塑料的情况长为6图示,与Std组(可含caspase-3和GSNO的肌原人造玻纤)较之,caspase-3组中30 kDa TnT细节描写偏态提高,证实caspase-3参于了TnT的吸附塑料,与此同时,caspase-3与GSNO的孵育造成30 kDa TnT回落。在100和200 μM GSNO组间不会检查测量到看不出的区别(P > 0.05),而当GSNO的酸度达标400 μM 时,该细节描写偏态以减少(P < 0.05)。哪些察觉到证实了SNO遮盖的caspase-3对TnT吸附塑料的抑制性帮助。结淀粉酶酶和TnT是caspase-3的特别敏感底物,而GSNO进行处理降底caspase-3的亲水性氧有可能造成肌原人造玻纤淀粉酶酶吸附塑料的情况降底。总而言之阐明,NO引发的S-亚硝基化可不可以可以通过遮盖半胱氨酸残基来调接caspase-3的亲水性氧,继而进一步明确骤引响其对结淀粉酶酶和TnT的淀粉酶酶水解反应效率,然后引响牛肉片品質。
图6. S-亚硝基化caspase- 3化学降解肌钙蛋清-T
二、个人总结
本实验为了更好地探析S-亚硝基化对caspase-3遮盖的不良引响简述自后对牛羊肉肌原植物仟维身体吸附的不良引响。蛋清质S-亚硝基化需要遮盖caspase-3的半胱氨酸残基,关键在于诱发caspase-3催化活性降低,进第一步促使了其对牛羊肉肌原植物仟维蛋清质的蛋清质溶解学习能力。三、拜谱总结ppt
探讨主要采用了酶活检验,亚硝基化掩盖组学剖析,WB等测量伎俩,知道淀粉酶S-亚硝基化可以掩盖caspase-3的半胱氨酸残基,这导至了caspase-3活性酶类的调低,并举步抑制性了其对鸡肉肌原氯纶淀粉酶的淀粉酶水解反应特性。本探讨为释义淀粉酶质亚硝基化对肉肥的改善策略供应新一个新的视觉。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司,可提供完善成熟的蛋清质组学、装饰蛋清质组学、产生组学、转录组学等多组学产品技术服务体系,整合多组学数据进行深入挖掘分析,全面解析机制机理等,助力高分文章发表。除此之外,拜谱生物还可提供半胱氨酸型号厂品,包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺碱化、total硫化重现、徘徊巯基,欢迎大家咨询!
参考使用学术论文:
Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663